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《GB 31658.6-2021 食品安全国家标准 动物性食品中四环素类药物残留量的测定 高效液相色谱法》节选：

8.1 提取

8.1.1 皮+脂肪

取试料5g(准确至&辫濒耻蝉尘苍;0.02g)，加二氯甲烷15mL，涡旋1min，振荡5min，加EDTA·2Na-Mcllvaine缓冲溶液15 mL，涡旋1 min，振荡5 min，8 500 r/min离心5 min，取上清液。下层溶液用EDTA•2Na-

Mcllvaine缓冲溶液重复萃取2次，每次15mL，合并上清液，中性滤纸过滤，备用。

8.1.2 肌肉、肝脏、肾脏、牛奶、鸡蛋

称取试料5 g(准确至&辫濒耻蝉尘苍;0.02 g)，加EDTA•2Na- Mcllvaine缓冲溶液20 mL，涡旋1 min， 振荡10 min，加硫酸溶液5 mL、钨酸钠溶液5 mL，涡旋1 min，8 500 r/min离心5 min，取，上清液。残渣用

EDTA•2Na-Mcllvaine缓冲溶液20 mL、10 mL各提取2次，合并，上清液，中性滤纸过滤，备用。

8.2 净化

HLB柱依次用甲醇、水和EDTA•2Na-Mcllvaine缓冲溶液各5 mL活化。备用液过柱，待全部备用液流出后，依次用水、5%甲醇溶液各10ml.淋洗，抽干30s，用甲醇6mL洗脱，收集洗脱液于刻度试管中，加水2 mL，混匀，过甲醇5 mL、水5 mL活化的LCX柱，待全部液体流出后，用水、甲醇各5 mL淋洗，抽干1 min，草酸乙腈溶液6mL洗脱，收集洗脱液，于40℃水浴氮气吹至0.5mL~1.0mL，再加甲醇0.4mL，用草酸溶液(0.01 mol/L)稀释至2. 0 mL，微孔滤膜过滤，高效液相色谱测定(上机溶液应在24 h内完成测定)。