如何根据液相系统配置合适的色谱柱
根据液相系统配置合适的色谱柱
可扩展的颗粒技术确保了我们的液相色谱柱可与广泛的色谱仪器匹配使用。根据分离的目标、所用的仪器平台或所分析的样品类型,您可以选择与系统配置匹配的更合适的色谱柱而不对色谱结果产生不利影响。
下表为根据仪器的分类选择合适的液相色谱柱提供了指南。
Nano/Micro | UPLC | UHPLC | HPLC | Preparative |
ACQUITY UPLC M-CLASS BEH (1.7μm) | ACQUITY UPLC BEH(1.7μm) | XBridge BEH XP(2.5μm) | XBridge BEH(3.5,5μm) | XBridge BEH OBD™(5,10μm) |
ACQUITY UPLC M-CLASS CSH(1.7μm) | ACQUITY UPLC CSH(1.7μm) | XSelect CSH XP(2.5μm) | XSelect CSH(3.5,5μm) | XSelect CSH OBD(5,10 μm) |
ACQUITY UPLC M-CLASS HSS(1.8μm) | ACQUITY UPLC HSS(1.8μm) | XSelect HSS XP(2.5μm) | XSelect HSS(3.5,5μm) | XSelect HSS OBD(5 μm) |
- | CORTECS UPLC(1.6 μm) | 颁翱搁罢贰颁厂(2.7μ尘) | 颁翱搁罢贰颁厂(2.7μ尘) | - |
UPLC M-Class | UPLC | XP | - | OBD |
色谱柱配置
系统扩散是每个色谱系统固有的,它是造成色谱谱带展宽的仪器因素,并取决于系统管路体、切换阀配件、柱连接以及流通池体积。系统扩散与色谱柱扩散一起构成了影响分离的总扩散因素。
因此,在选择色谱柱配置时了解系统对于色谱峰谱带展宽的影响是非常重要的。扩散值高的系统使用较大柱体积的色谱柱可以获得更好柱效;相反,扩散值低的系统使用较小柱体积的色谱柱可以获得更好柱效。
下表总结了沃特世液相系统的参数特点以及在保证色谱分离效率条件下可匹配的色谱柱配置。
在液相方法转移时,仪器扩散也是需考虑的液相色谱仪器参数之一。了解仪器的谱带展宽体积有助于开发系统兼容的方法,使您无缝缩放色谱柱规格或实现方法在不同仪器平台和实验室功能方面的转换。下表是根据不同仪器的谱带展宽值给出的色谱柱配置建议。
液相色谱柱的L/dp值对比表
为了保证一个HPLC方法转移到UPLC或UHPLC方法时不损失分离度,需要选择柱长与粒径比值(L/dp)相当的色谱柱。
沃特世公司用这个比值来衡量一个色谱柱的分离能力。L/dp值相等的色谱柱可以获得相同的分离度。因此,对于两根具有相当L/dp值的色谱柱,越短的色谱柱(粒径较小的填充颗粒)则可以在更短的时间内提供相当的分离效果。