Waters氨基酸标准品试剂盒的维护和使用
I. 介绍
制药及食品和饲料行业中的许多应用都需要进行氨基酸分析。沃特世提供多款游离氨基酸标准品,用于氨基酸的定性和定量测定、方法开发以及AccQ•Tag™ Ultra或AccQ•Tag方法的故障排查。本维护和使用手册详细说明了上述标准品的使用方法。
本产物仅供研究使用,无法用于诊断。
II. 复溶指南
配合紫外或荧光检测仪器常规使用时,复溶方法如下:
说明 | 推荐供应商 |
0.1 M HCl | 推荐使用LC-MS级HCl (Honeywell Fluka 35335或类似试剂) |
细胞培养标准品试剂盒(P/N:186009300)
1. 取1.2 mL 0.1 M HCl,加入17种水解氨基酸标准品(蓝色样品瓶)中,每种氨基酸的浓度均为1000μM(胱氨酸除外,其浓度为500μM)。涡旋混合10 s。复溶后冷冻保存,标准品可稳定存放60天。
2. 取250μL 0.1 M HCl,加入细胞培养补充氨基酸标准品(白色样品瓶)中,每种氨基酸浓度均为1000μM。涡旋混合10 s。复溶后冷冻保存,标准品可稳定存放60天(谷氨酰胺仅可存放15天)。
3. 将250μL制备好的水解氨基酸标准品加入细胞培养补充氨基酸标准品样品瓶中,得到500μL浓度为500μM的氨基酸标准品溶液(胱氨酸除外,其浓度为250μM)。该溶液作为标准品储备液,以建立标准曲线。冷冻保存,该标准品可稳定存放60天(谷氨酰胺仅可存放15天)。
注:如果发现隔垫上有固态标准品,请在旋涡混合时翻转样品瓶,确保所有粉末均溶解。
食品和饲料标准品试剂盒(P/N:186009299)
1. 取1.2 mL 0.1 M HCl,加入17种水解氨基酸标准品(蓝色样品瓶 )中,每种氨基酸的浓度均为1000μM(胱氨酸除外,其浓度为500μM)。涡旋混合10 s。复溶后冷冻保存,标准品可稳定存放60天。
2. 取250μL 0.1 M HCl,加入食品和饲料补充氨基酸标准品(绿色样品瓶 )中,浓度均为1000μM。涡旋混合10 s。复溶后冷冻保存,标准品可稳定存放60天。
3. 将250μL制备好的水解氨基酸标准品加入食品和饲料补充氨基酸标准品样品瓶中,得到500μL浓度为500μM的氨基酸溶液(胱氨酸除外,其浓度为250μM)。该溶液作为标准品储备液,以建立标准曲线。如果复溶后冷冻保存,标准品可稳定存放60天。
注:如果发现隔垫上有固态标准品,请在旋涡混合时翻转样品瓶,确保所有粉末均已溶解。
校准标准品制备示例
采用如下稀释方案创建校准标准品系列。这将作为创建标准曲线的初始校准标准品储备液。
1. 校准标准品7:500μM(胱氨酸250μM)- 50μg/mL(胱氨酸25μg/mL)
首先将试剂盒内的大样品瓶和小样品瓶复溶并合并,然后从装有500 μL 500 μM 26种氨基酸(细胞培养标准品)或21种氨基酸(食品和饲料标准品)的样品瓶开始操作。
2. 校准标准品6:250 μM(胱氨酸125 μM)- 25 μg/mL(胱氨酸12.5 μg/mL)
取215 μL校准标准品7,加入校准标准品6样品瓶中。加入215 μL 0.1 M HCl。混合。
3. 校准标准品5:100 μM(胱氨酸50 μM)- 10 μg/mL(胱氨酸5 μg/mL)
取150 μL校准标准品6,加入校准标准品5样品瓶中。加入225 μL 0.1 M HCl。混合。
4. 校准标准品4:20 μM(胱氨酸10 μM)- 2 μg/mL(胱氨酸1 μg/mL)
取93 μL校准标准品5,加入校准标准品4样品瓶中。加入372 μL 0.1 M HCl。混合。
5. 校准标准品3:10 μM(胱氨酸5 μM)- 1 μg/mL(胱氨酸0.5 μg/mL)
取182 μL校准标准品4,加入校准标准品3样品瓶中。加入182 μL 0.1 M HCl。混合。
6. 校准标准品2:2.5 μM(胱氨酸1.25 μM)- 0.25 μg/mL(胱氨酸0.125 μg/mL)
取84 μL校准标准品3,加入校准标准品2样品瓶中。加入252 μL 0.1 M HCl。混合。
7. 校准标准品1:0.5 μM(胱氨酸0.25 μM)- 0.05 μg/mL(胱氨酸0.025 μg/mL)
取56 μL校准标准品2,加入校准标准品1样品瓶中。加入224 μL 0.1 M HCl。混合。
正缬氨酸内标(P/N:186009301)
取6 mL稀释剂,加入内标(红色样品瓶)中,涡旋 混合10 s,浓度为250μM。
III. 储存
收货后请核对试剂盒清单。如果包装被打开、损坏,内容物缺失或超出有效期,请勿使用本产物(如果适用)。如需订购替换试剂盒或部件,请联系当地的销售代表。订购时请提供所需产物的产物部件号和批号。
P/N | 说明 | 复溶后的储存条件 | 初始储存条件 |
186009299 | 氨基酸 食品饲料标准品 试剂盒 | 氨基酸食品和饲料标准品: -10℃词-25℃条件下存放至多60天。 氨基酸17种水解产物标准品: -10℃词-25℃条件下存放至多60天。 | 收货后请冷冻保存于-10℃词-25℃。有效期限参见COA 报告(Certificate of Analysis)。 |
186009300 | 氨基酸 细胞培养标准品 试剂盒* | 氨基酸细胞培养标准品: -10℃词-25℃条件下存放至多60天。* 氨基酸17种水解产物标准品: -10℃词-25℃条件下存放至多60天。 | 收货后请冷冻保存于-10℃词-25℃。有效期限参见COA报告(Certificate of Analysis)。 |
WAT088122 | 水解氨基酸 标准品 | N/A | 收货后请冷冻保存于-10℃词-25℃。有效期限参见标签。 |
186009301 | 氨基酸内标 - 正缬氨酸 | -10℃词-25℃条件下存放至多60天。 | 收货后请冷冻保存于-10℃词-25℃。有效期限参见COA报告(Certificate of Analysis)。 |
*复溶后,细胞培养试剂盒中的谷氨酰胺会随时间推移降解。如果复溶后冷冻保存,产物标示的谷氨酰胺浓度在最长15天内有效。